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Las Glucogenosis en España

ción está presente en el 36% de los alelos y la R83H representa el 38% de los pa-
cientes. En la población hispanoamericana (18 alelos), árabe musulmana (8 ale-
los)
e india (8 alelos) examinado el número de casos es insuficiente para extraer
unas conclusiones claras. Aun así se comprobó que en los hispanoamericanos el
50% de los alelos son 380insTA, que parece único para este grupo poblacional, y
un 28% son R83C. En los árabes musulmanes el 50% de los alelos analizados son
V166G, que también parece ser único para este grupo. En los indios el 100% de
los alelos son 150delGT, que una vez más parece ser único (ver tabla 1) (6).

Las G6Pasas de mamíferos son glicoproteínas hidrofóbicas de 36-kDa y 9 hé-
lices transmembrana (ver figura 6) con su sitio activo cara al lumen, que contie-
nen 2 residuos de lisina adyacentes en el grupo carboxilo terminal que actúan de
retenci
ón sobre la membrana del retículo endoplasmático. Esto es consistente con
la conocida localización de la enzima (2).

Tabla 1. Mutaciones de la G6Pasa identificadas en pacientes con GSD-Ia caucásicos, japoneses, chinos, judíos,
hispanoamericanos, árabes musulmanes e indios. Chou (6).

Se ha predicho un posible mecanismo de catálisis de la G6Pasa al entrar en
contacto
con la glucosa-6-fosfato, en la que estarían implicados 6 aminoácidos (a
saber K76,R83,HI 19,R170y H176, todos ellos situados en la cara luminal de la
enzima). El H176 podría actuar como un nucleófilo formando un compuesto en-
zimatico intermedio de fosfohistidina, los R83 y R170 podrían donar enlaces de
hidrógeno al fosfato y estabilizar el estado de transición y el H119 podría propor-
cionar los protones necesarios para liberar la mol
écula de glucosa (ver figura 5).
Para determinar si R83, H119 y H176 juegan papeles cruciales en el proceso de
catálisis de la G6Pasa, un gran número de mutantes se construyeron para estos 3
residuos. Los estudios de expresión de la enzima mostraron que todas las muta-

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ciones suprimen la actividad de la G6Pasa, demostrando la importancia de estos
residuos en la reacci
ón de defosforilación. Todavía no se han estudiado los pape-
les que juegan en la catálisis los residuos K76 y R170 (2).



Figura 5. Mecanismo de reacción catalítica propuesto para los aminoácidos R83, H119, R170 y H176 de la
G6Pasa. La línea continua representa a la proteína catalizadora en la que se encuentran fijados dichos aminoá-
cidos Chou (2).

No existe ninguna relación directa entre el genotipo y el fenotipo para cada
mutación del gen causante de la GSD-Ia, aunque algunos autores sugieren que
existen algunas mutaciones asociadas, más comúnmente, con más o menos feno-
tipos severos. La posibilidad de una base de datos de la actividad residual retenida
de todas las mutaciones facilitaría una mejor correlación del genotipo con el fe-
notipo en el futuro. El conocimiento de la actividad mínima requerida por la
G6Pasa para prevenir episodios hipoglucémicos en pacientes con GSD-Ia podría
ayudar al desarrollo de nuevas terapias (6).



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Las Glucogenosis en España

Existen modelos complementarios de ratones y perros con GSD-Ia. Ambos son
fisiológicamente similares a los humanos con respecto al metabolismo de la glu-
cosa-6-fosfato (6).








Figura 7. Organización estructural y localización cromosómica de la unidad de trascripción de la G6PT hu-
mana. Las regiones codificantes de los exones se muestran en negro y las regiones no codificantes se muestran
en blanco. El exón VII se expresa únicamente en la trascripción del vG6PT. Chou (2).

1.2.2. Transportador de la glucosa-6-fosfato (G6PT).






Es un gen de copia simple compuesto de
9 exones y que se extiende a lo largo de 5,3
kb de ADN cromosómico, aproximadamente.
Este gen está localizado en el cromosoma
11q23. Existen dos transcripciones alternati-
vas, G6PT y vG6PT, que difieren en la pre-
sencia o ausencia de la secuencia del exón 7
(ver figura 7) (2).

Hasta ahora se descubrieron de 69 muta-
ciones en el gen de la G6PT (ver figura 8),
correspondientes a 139 pacientes con GSD-
Ib. Se pueden dividir en 28 mutaciones mis-
sense, 17 de inserción/delección (incluyendo
2 de delecci
ón de codón), 10 nonsense y 14
splicing. Estudios de expresión transiente,
efectuados en 18 de las mutaciones de la
G6PT identificadas, han demostrado que 16
mutaciones missense suprimen el transporte
microsómico de la glucosa-6-fosfato estable-
ciendo un defecto en la G6PT como base mo-
lecular de la GSD-Ib (6). Las mutaciones
G20D, F93del y I278N, localizadas en las hé-
lices 1, 2 y 6, respectivamente, desestabili-
zan la G6PT, lo que sugiere que la integridad

Figura 8. Esquema que muestra a la proteina
G6PT codificada por los 8 exones, con 66 de
las 69 mutaciones identificadas hasta ahora.
De izquierda a derecha: mutaciones de inser-
ción/deleción, splicing, missense y nonsense.
Las mutaciones que han sido funcionalmente
identificadas están en negrita Chou (2).

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estructural de las hélices transmembrana son críticas para la proteína. Las rela-
ciones con la disfunción neutrófilo/mieloide, que define a las GSD-Ib de manera
clara, permanecen sin delimitar clínicamente, así como el papel funcional de la
proteína (reconocimiento del sustrato, enlace y transporte al interior del lumen) (6).

Al igual que en la GSD-Ia, las mutaciones en la GSD-Ib muestran una varia-
bilidad étnica (ver tabla 2). En pacientes caucásicos, la 1042delCt (31%) y la
G339C ( 15%) son las mutaciones prevalentes, con alrededor del 40% de los casos,
mientras que en los pacientes japoneses la W118R es la prevalente con el 39% de
los alelos totales. El número de alelos en raza beduina, paquistaní, china y negra
es insuficiente para extraer ningún tipo de conclusión estadística, aunque otra vez
se manifiesta la especial propensión de estos grupos hacia unas determinadas mu-
taciones (R28H para beduinos, 936insA y IVS8+2del4 para paquistaníes, G88D
para la raza negra
y H191L para la china) (6).

Tabla 2. Mutaciones de la G6PT identificadas en pacientes con GSD-1b caucásicos, japoneses, chinos, bedui-
nos, paquistaníes y de raza negra. Chou (6).

El análisis del perfil hidropático de la secuencia aminoacídica de la G6PT pre-
dice que este transportador es una prote
ína hidrofóbica anclada en la membrana
del retículo endoplasmático por 10 hélices transmembrana. La orientación de dicha
prote
ína, después de una serie de ensayos, se dedujo que era con el N y el C ter-
minales cara al citoplasma (ver figura 9). La masa molecular calculada de las proteínas G6PT de los mamíferos es de 46 kDa. El vG6PT que contiene 22
aminoácidos adicionales codificados en el exón 7 del gen es también activo en el
transporte de la glucosa-6-fosfato microsómica. Estudios cinéticos hechos sobre



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